细胞培养时bsa与fbs有什么不同?

宝宝妈妈2023-06-23  96

牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种白蛋白在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性。

牛血清白蛋白(BSA)用途:

1、 在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,减轻不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的。

2 、ELISA中也常常用到,比如封闭液,样本稀释液,酶结合物稀释液都可以用BSA。

3、生化研究,遗传工程和药物研究。

胎牛血清(fbs)是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。

胎牛血清(FBS)的作用:

1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。

3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5、起酸碱度缓冲液作用。

6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

完全培养基DMEM加胎牛血清。

小牛血清和胎牛血清的区别:

1、来源不同:

(1)小牛血清取自出生10-30天的小牛,出生三月龄小牛动脉采血分离血清。

(2)胎牛血清是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。

2、品质不同:

(1)小牛血清品质不如胎牛血清。

(2)胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

3、用途与用法不同:

(1)小牛血清而有些细胞只需小牛血清即可。

(2)胎牛血清某些细胞必需胎牛血清才能生长。

4、外观不同:

(1)小牛血清外观黄色澄清,微溶血,有异物稍粘稠液体。

(2)胎牛血清是一种性状,外观浅黄色澄清,无溶血,无异物稍粘稠液体。

扩展资料

1、牛血清的功能:

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。

(1)提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

(2)提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。

(3)有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。

(4)是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

(5)起酸碱度缓冲液作用。

(6)提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

2、解冻血清注意事项:避免产生沉淀物

(1)解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃,实验显示非常容易产生沉淀物。

(2)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生

(3)请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。

(4)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。

(5)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。

血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理。欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。

参考资料来源:百度百科-胎牛血清

百度百科-血清


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