
Rf is also known as the retardation factor
Chromatography is used in the separation of a mixture of fluids (for this explanation,liquids are used)
Let me explain the rudimentary method:paper chromatography
1Draw a pencil line on a piece of rectangular filter paper,and put a dot of liquid on the line
2Dip one end of stationary phase in a moving phase (eg pure water or ethanol will suffice)
3Due to different absorption properties and solubilities of each constituent,each liquid will move up the paper at different rates,effectively separating them
4The retardation factor,a measure of absorption,is calculated by Rf = (distance travelled by unknown) / (distance travelled by solvent)
Each substance has a specific Rf value,and is useful for scientists to identify them using their unique Rf valuesThis allows us to study what is contained in a mixture (eg in the study of the constituents of the coloured pigments making up chlorophyll)
This is what a paper chromatogram looks like
It is the distance travelled by the sample or analyte divided by distance travelled by the solvent front in chromatography
试样经层析后可用比移值(Rf)表示各组成成分的位置(比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比),由于影响比移值的因素较多,因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同
先制备薄层板,即在大小适当的玻璃板上,均匀涂上吸附剂,厚度在一毫米以内,然后在距底边15厘米处点上样品溶液,形成一个小点,称为“原点”再将薄层板置于盛有动相溶剂的玻缸内(此溶剂称为“展开溶剂”,玻缸称为“展开槽”)当溶剂沿薄层扩散到距原点以上一定距离时(一般10—12厘米),取出薄层板,记录展开溶剂扩展前沿距原点的距离A然后用喷洒显色试剂或紫外光线照射的方法使被分离的化合物显色,此过程称为“显谱”观察并记录所显斑点的中心距原点的距离斑点在薄层板上的位置通常用比移值(Rf)表示Rf值为斑点中心距原点的距离与溶剂展开前沿距原点距离的比值
:
斑点中心至原点的距离
Rf=───── ─────
溶剂前沿至原点的距离
Rf值是与物质在两相中分配系数相关的数值,因此,在特定条件下为一常数不同的物质由于在特定色谱条件下的两相间分配系数的差异,而有着不同的Rf值,这样就达到薄层色谱分离的目的
Rf
value
写做Rf值。主要是纸上层析法的用词。源自流速(rate
of
flow)。溶剂从原点渗透到距离a(一般在20—30厘米时测定)的时候,如果位于原点的物质从原点向前移动到b,那么b/a的值(00—10)就是这种物质的Rf值。例如把葡萄糖和果糖在20℃下于正丁醇-醋酸-水(4∶1∶5)中展开,可分别得到018、023的Rf值,在醋酸乙酯-吡啶-水(2∶1∶1)中展开,则分别得到028、032的Rf值。若滤纸、溶剂温度等保持恒定,则各种物质呈现特定的Rf值,成为鉴定物质的极重要的常数。
Rf值与物质在两相中分配系数相关的数值,因此,在特定条件下为一常数。不同的物质由于在特定色谱条件下的两相间分配系数的差异,而有着不同的Rf值,这样就达到薄层色谱分离的目的。
薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。
薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。
扩展资料
优点
薄层层析有许多优点:
1、保持了 *** 作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;
2、混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍,它既适用于只有0.01μg的样品分离。
3、又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。
薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。
参考资料来源:百度百科-RF
参考资料来源:百度百科-薄层色谱法
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